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黄曲霉毒素总量Elisa检测试剂盒
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产品介绍
黄曲霉毒素总量Elisa检测试剂盒
【产品简介】：
黄曲霉毒素总量ELISA检测试剂盒是利用免疫直接竞争法检测原理建立的一种定量检测试剂盒。具有简单、快速，无需特殊仪器设备等优势，既可以在实验室进行，也可在农场、饲料混合车间等进行实地测定。本试剂盒结果[accuracy]，灵敏度度为0.1ppb，[accuracy]率大于95% 。适用于粮食、食品、饲料原料、配合饲料等样本中的黄曲霉毒素总量的检测。
【适用范围】：
可定性、定量检测谷物、花生、食用油、饲料、啤酒、红酒、酱油、面粉等样本中的黄曲霉毒素总量。
【试验原理】：
黄曲霉毒素总量ELISA检测试剂盒采用竞争ELISA，在微孔板上预包被黄曲霉毒素抗原，加入样本（或黄曲霉毒素标准品溶液）及辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素总量抗体。样本或标准品溶液中的黄曲霉毒素与预包被在板孔上的黄曲霉毒素抗原竞争结合辣根过氧化物酶标记的黄曲霉毒素抗体，与样本或标准品溶液中的黄曲霉毒素结合的酶标抗体在洗涤时被除去，再加入显色液，读取吸光值。样本的吸光值与其所含残留物黄曲霉毒素抗原的含量成负相关。对照标准曲线，即可得出相应残留物黄曲霉毒素的含量。
【试剂配制】：
（1）将黄曲霉毒素总量ELISA检测试剂盒取出放置于室温中，使试剂盒回温至室温 (20-25℃)。
（2）10倍稀释洗涤液准备：40mL浓缩洗涤液 (10×)，用蒸馏水或去离子水稀释至 400mL。在2-8℃可保存三个月。用前混匀。
（3）10倍稀释浓缩样品稀释液准备：20mL浓缩样品稀释液 (10×)，用蒸馏水或去离子水稀释至 200mL。在2-8℃ 可保存三个月。用前混匀。
参数规格
【试剂盒组成】：
1、96孔酶标板×1块
2、标准液×6瓶：（1ml/瓶）
0ppb, 0.1ppb, 0.3ppb, 0.9ppb, 2.7ppb, 8.1ppb
3、酶标物 1瓶 …………………………………… 6ml
4、底物液1瓶 ………………………………… 12ml
5、终止液1瓶 ……………………………………6ml
6、浓缩洗涤液（10×）1瓶………………………40ml
7、浓缩样品稀释液（10×）1瓶…………………20ml
8、操作说明书一份
注意：标准品含有低浓度黄曲霉毒素、终止液含2M HCl，需小心取用。勿在有效期外使用本试剂盒。
使用保养
【操作步骤】：
（一）谷物（样品稀释10倍）
1、脂肪含量少的谷物样品（如大米、玉米、小米等）称取1g（精细粉碎），加入4ml 50%甲醇/水溶液；
2、充分振荡3min；
3、5000g离心，10min；
4、取400ul上清液，加600ul样品稀释液，充分混匀；
5、取50ul溶液用于检测。
（二）花生（样品稀释10倍）
1、称取1g样品（精细粉碎），加入2ml石油醚，再加入4ml 50%甲醇/水溶液；
2、充分振荡3min；
3、5000g离心，10min；
4、取400ul下层清液，加600ul样品稀释液充分混匀
5、取50ul溶液用于检测。
（三）食用油（样品稀释10倍）
1、称取1g样品，加入4ml石油醚，充分振荡；
2、再加4ml 50%甲醇/水溶液，轻摇3min，静置分层；
3、取400ul下层清液，加600ul样品稀释液充分混匀；
4、取50ul溶液用于检测。
（四）饲料（样品稀释5倍）
1、称取1g饲料样品（精细粉碎），加入4ml 50%甲醇/水溶液；
2、充分振荡3min；
3、5000g离心，10min；
4、取上层清液2ml并加入2ml三氯甲烷，轻摇3 min，静置分层；
5、取1ml下层液（三氯甲烷层），60℃氮气吹干；
6、加入500ul 50%甲醇/水（1:1）溶液溶解，并加入750ul样品稀释液，充分混匀；
7、取50ul溶液用于检测。
（五）面粉（样品稀释10倍）
1、称取1g面粉样品，加入4ml 50%甲醇/水溶液；
2、充分振荡3min；
3、5000g离心，10min；
4、取上层清液500ul并加入1ml三氯甲烷，轻摇3 min，静置分层；
5、取500ul下层液（三氯甲烷层），60℃氮气吹干；
6、加入250ul 50%甲醇/水溶液溶解，并加入375ul样品稀释液，充分混匀；
7、取50ul溶液用于检测。
（六）葡萄酒（样品稀释5倍）
1、取1ml葡萄酒样品，加入4ml三氯甲烷；
2、轻摇3 min，静置分层；
3、取1ml下层液（三氯甲烷层），60℃氮气吹干；
4、加入500ul 50%甲醇/水溶液溶解，再加入750ul样品稀释液，充分混匀；
5、取50ul溶液用于检测。
（七）啤酒（样品稀释10倍）
1、取1ml啤酒样品（去除CO2），加入2.5ml甲醇，再加入1.5ml蒸馏水；
2、振荡3min；
3、取出500ul振荡后的溶液再加入750 ul样品稀释液，充分混匀；
4、取50ul溶液用于检测。
（八）酱油、醋（样品稀释5倍）
1、称取1g样品，加入1ml蒸馏水和4ml三氯甲烷；
2、轻摇3min，静置（若未分层，5000g离心10min）；
3、去1ml下层液（三氯甲烷层），60℃氮气吹干；
4、加入500ul 50%甲醇/水溶液溶解，并加入750ul样品稀释液，充分混匀；
5、取50ul溶液用于检测。
【注意事项】：
1、室温低于20℃或试剂及样本没有回到室温（20～25℃）会导致所有标准的OD值偏低。
2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。
3、每加一种试剂前需将其摇匀。
4、反应终止液为2M盐酸，避免接触皮肤。
5、不要使用过了有效日期的试剂盒；也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂，掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低；不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。
6、储存条件
保存黄曲霉毒素总量ELISA检测试剂盒于2～8℃，不要冷冻，将不用的酶标板微孔板放进自封袋重新密封。标准物质和无色的显色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。
7、试剂变质的迹象
显色试剂有任何颜色表明显色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度（OD450nm）值小于0.5（A450nm<0.5）时，表示试剂可能变质。
8、该黄曲霉毒素总量ELISA检测试剂盒理想中反应温度为25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。
巴玖小贴士
【贮藏条件及保存期】：
贮藏条件：保存试剂盒于2～8℃。
保存期：该产品有效期为12个月。
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